食品中三聚氰胺檢測的固相萃取方法

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為牛奶樣品中三聚氰胺檢測的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。SimplyGreen MCX固相萃取柱60mg/3mL柱凈化效果良好，回收率滿足測試要求，重現(xiàn)性好，與知名廠商同型號柱性能相當。

二、實驗目標物

三聚氰胺 (CAS:108-78-1)

三、應用范圍

本方法適用于食品中三聚氰胺的HPLC檢測及確證。

四、參考標準

《GB/T 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》。

五、實驗材料

SimplyGreen MCX固相萃取柱60mg/3mL 。

六、實驗方法

1、樣品提取

稱取2.0ｇ試樣(精確至0.001 g)于50 mL離心管中，加入15 mL 1%三***溶液和5 mL乙腈，超聲提取10 min，再振蕩提取10 min，4000 r/min離心10 min。上清液經(jīng)三***溶液潤濕的濾紙過濾后，用三***溶液定容至25 mL，移取5 mL濾液，加入5 mL水混勻后做待凈化液。

2、SPE柱凈化

(1)活化：使用前依次用3 mL甲醇、5 mL水活化柱子。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用3 mL水、3 mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6 mL5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過1 mL/min。
(3)重新溶解：洗脫液于50 ℃下用氮氣吹干，殘留物用1 mL流動相定容，渦旋混合1 min，過微孔濾膜后，供HPLC測定。

3、HPLC條件

設備：Waters Alliance 2690
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：240 nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相：離子對試劑緩沖液(準確稱取2.10 g檸檬酸和2.16 g辛烷磺酸鈉，加入約980 mL水溶解，調(diào)節(jié)PH至3.0后，定溶至1 L備用)-乙腈(80:20, v/v)。
柱溫：室溫
進樣體積：20μL
流速：1 mL/min